hplc名词解释 高效液相色谱法

液相色谱法是一种以液体为流动相的色谱分离与分析技术。相较于以气体为流动相的气相色谱法，液相色谱法采用液体作为流动相，其高效和快速的特性促使其获得了快速发展。此法是在传统液相柱色谱的基础上，借鉴了气相色谱等理论与实践技术，借助高压输液泵、高效固定相和高灵敏度检测器等设备，成功实现了快速分析、高效分离以及自动化操作。这种方法又被称为高效液相色谱法，或者高压液相色谱法。

高效液相色谱法具有以下显著特点：高压力运作、高速分析、高效率、高灵敏度以及广泛应用。

柱外效应指的是除色谱柱内部因素外的，引起色谱峰变宽的各种外部因素。例如，当流动相在管壁附近的流速较管中心慢时，会导致峰形展宽，特别是在使用小内径色谱柱时，这种效应更加明显。为了减少柱外效应，需要关注进样精确度以及连接管的死体积，确保样品能直接进入柱头中心。检测器流通池体积及其连接管等也会影响柱后展宽，采用小体积检测器可有效降低这种影响。

关于高效液相色谱仪：

流动相的差异是液相色谱仪与气相色谱仪的主要区别。高效液相色谱仪主要包括高压输液泵、梯度淋洗装置、进样装置、色谱柱、检测器和记录系统等关键部件。

其工作流程大致如下：储液器中的流动相经高压泵送至色谱柱进行冲洗。当系统达到平衡且基线平直后，样品通过注射器进入进样器，并被流动相带入色谱柱进行分离。分离后的组分随后被检测器捕捉，并将输出的信号通过放大器记录下来。

关于高效液相色谱仪的各个部件：

1. 高压输液泵是输送流动相的关键设备，需具备稳定的流量、较高的输出压力、抗化学腐蚀性、小死体积以及便捷的操作与维护。

2. 梯度淋洗装置适用于复杂样品的分析，通过在分离过程中连续改变流动相的配比、极性、PH值和离子强度，达到提高分离效果和分析速度的目的。

3. 进样装置需确保样品在进入色谱柱前不与流动相混合，以“点进样”的方式直接注柱头中心，常见的进样方式包括隔膜进样、停留进样、阀进样和自动进样等。

4. 色谱柱是分离的核心，其性能决定着分离效果。通常采用填充柱，即将固定相按特定方法填入柱中。对色谱柱管的要求是耐高压、耐腐蚀，一般由厚壁玻璃管或经过抛光处理的不锈钢制成。

5. 检测器需具备高灵敏度、良好的重现性、宽线性范围、低噪声以及准确的定量能力。高效液相色谱检测器分为通用型检测器和选择性检测器，各有其应用范围和特点。